with agglomeration-type or fibrous microstructures. - Monolithen sind zusammenhängende stationäre Phasen, die in einem Stück als homogene Säule mit unterschiedlichen Größen mit agglomerierten oder fibrösen Mikrostrukturen gefertigt werden.
(Iberer, G., Hahn, R., Jungbauer, A. LC-GC, 1999, 17, 998)
MONOLITHISCHE TRÄGER
Die Vorteile der monolithischen Matrix bei der Trennung von Biomolekülen sind zahlreich. Monolithen entwickeln sich aufgrund ihrer hydrodynamischen Eigenschaften immer mehr zu interessanten stationären Phasen. Die innovative CIM®-Technik ermöglicht die Kombination wichtiger Trennaspekte:
· flussunabhängige dynamische Bindungskapazität
· flussunabhängige Auflösung
· hohe Reproduzierbarkeit
· lange Lebensdauer in Verbindung mit einem einfachen Scale-Up
· Kompatibilität mit bestehenden HPLC-Systemen und Vielseitigkeit
HPLC Säulen für schnelle Trennungen werden immer populärer, denn das Augenmerk richtet sich auf High-Throughput-Separation und kombinatorische Chemie sowie LC-MS und LC-MS-MS. Eine Verkürzung der Analysenzeit, bei verstärktem Probendurchsatz und gleichzeitiger Senkung der Kosten pro Probe, ist enorm wichtig. Die monolithischen CIM® Träger bieten eine neue Möglichkeit diese Ziele zu erreichen. Sie sind ideale Werkzeuge für high-throughput Screening in Forschung und Methodenentwicklung. Besonders die Möglichkeit, CIM® im CLC-Modus (Conjoint Liquid Chromatography - die Kombination mehrerer Liganden in einer Säule) zu verwenden, macht diese Trägermaterialien attraktiv für Routinearbeiten.
DAS WERKZEUG
CIM Convective Interaction Media® gibt es als CIM® Disk (analytisch), CIM® Tube (präparativ) und als CIM HiP2 Plasmid Process PackTM. Grundlage sind Co-polymere von Glycidylmethacrylatethylenglycol dimethacrylat oder Styroldivinylbenzol. Diese stationären Phasen werden entsprechend der Anwendung funktionalisiert. Die analytischen Träger werden axial durchflossen, die präparativen Medien hingegen radial. Sowohl im analytischen als auch im präparativen Bereich werden Ihre Trennzeiten erheblich verkürzt. CIM® monolithische Trägermaterialien sollten daher für schnelle Trennungen Ihre erste Wahl sein.
Hydrodynamische Eigenschaften
· Dank der Herstellungsweise der monolithischen CIM® Trägermaterialien, durchläuft die mobile Phase das Gesamtvolumen der Matrix.
· Die zu trennenden Substanzen werden auf aktive Gruppen, die sich auf den Porenöberflächen befinden, durch den Gesamtfluss (Convection) übertragen (keine Diffusion aufgrund stagnierender Zonen in geschlossenen Poren).
· Da konvektiver Transport um einige Größenordnungen schneller als diffuser Transport ist, ist entsprechend auch der Austausch zwischen mobiler und stationärer Phase schneller. Als Folge sind die Trägercharakteristiken weniger flussabhängig.
VORTEILE
Die monolithischen CIM Convective Interaction Media® Trägermaterialen zeichnen sich u.a. durch folgende Vorteile aus:
· Äußerst schnelle Trennungen: Trennungen innerhalb weniger Sekunden sind möglich.
· Hohe Auflösung: Die hohe Auflösung der monolithischen CIM® Trägermaterialien ist flussunabhängig.
· Hohe Bindungskapazität: CIM® ermöglicht eine flussunabhängige Bindungskapazität. Ca. 30 mg HSA/ml Bettvolumen können mit einer CIM® QA Disk gewonnen werden.
· Produktivität: CIM® Träger vereinigen die Vorteile von herkömmlichen Chromatographiesäulen in Bezug auf Trennleistung,
Kapazität und Probenverteilung mit denen der Membrantechnologie, die sich durch den konvektiven Stofftransport auszeichnet. Die
Vorteile resultieren in viel schnelleren Trennungen, höheren volumetrischen Durchlässen und einem sehr niedrigen Gegendruck.
· Hohe Flussraten bei sehr niedrigem Gegendruck: Reduzieren Sie Ihre Aufarbeitungszeiten und profitieren Sie von geringeren
Aufarbeitungsprozesskosten.
· Exzellente Ausbeute von Proteinen: CIM® Trägermaterialien zeigen eine niedrige unspezifische Bindung von Biomolekülen, die zu
einer exzellenten Ausbeute von Proteinen führt.
· Hohe Batch-to-Batch Reproduzierbarkeit - ist selbstverständlich bei den monolithischen CIM® Trägermaterialien und ein
unentbehrlicher Zustand für erfolgreiche tägliche Routinearbeit.
· Einfache Handhabung: Die Arbeit mit CIM® ist sehr einfach. Plazieren Sie die CIM® Disk in das dafür vorgesehene Gehäuse, und
schon kann die Arbeit beginnen.
· Kompatibel mit jeder peristaltischen Pumpe oder jeder LC/HPLC- oder FIA-Anlage. Dies ermöglichen u.a. die von CIM® verwendeten
standard VALCO-Typ Anschlüsse.
· Austauschbare CIM® Träger: Alle CIM® Disks verfügen über gleiche Abmessungen and passen daher in das gleiche Gehäuse.
Durch das Austauschen unterschiedlicher CIM® Disks, ist es möglich innerhalb kürzester Zeit unterschiedliche monolithische CIM®
Säulen zu erstellen. Dieses ermöglicht es Ihnen, Ihre Analysen hintereinander in unterschiedlichen Modi durchzuführen. Schnelle
Analysen können Sie z.B. mittels Ionenaustauschchromatographie mit einer CIM® Disk QA Säule durchführen. Dann tauschen Sie die
Disk beispielsweise mit einer CIM® Protein A Disk aus, und arbeiten mit der Affinitätschromatographie weiter. Die Trennungen sind so
schnell, dass mehr als 100 Injektionen pro Arbeitstag möglich sind.
· Einstellbare Säulenlänge: Arbeiten auf Laborebene war noch nie so einfach. Plazieren Sie einfach mehrere CIM® Disks (bis zu 4
Stück) in ein Gehäuse und Auflösung und Trennkapazität erhöhen sich dementsprechend. Innerhalb einer Minute können CIM® Disks
Ihren speziellen Anforderungen angepasst werden.
· Sehr lange Lebensdauer: Einige hundert Analysen können ohne signifikante Änderung der Auflösung durchgeführt werden.
· Conjoint Liquid Chromatography (CLC): Eine der wichtigsten und fortschrittlichsten Innovationen von CIM® ist die Möglichkeit,
verschiedene Liganden in einem Gehäuse zu verwenden. Proteintrennungen- und reinigungen mit niedrigem Totvolumen in einem
Schritt werden viel einfacher und kostengünstiger. |
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